Секвенирование
уклеотидов.
Химический метод (метод Максама-Гилберта) проще использовать в том
случае, когда исследуемая ДНК не слишком велика (200-500 звеньев). В том
случае, если речь идет о секвенировании высокомолекулярной ДНК, лучше
применять метод полимеразного копирования (метод Сэнгера) , чтобы не
вводить процедуру рестриктазного расщепления с выделением индивидуальных
фрагментов. При энзиматическом секвенировании протяженных одноцепочечных
ДНК (например, бактериофагов) можно применять набор олигонуклеотидов-
затравок, синтез которых в настоящее время не требует больших затрат
времени и труда. Для двутяжевых высокополимерных ДНК наиболее удобен метод
слепого энзиматического секвенирования с применением универсальной затравки
(их выпускают многие фирмы) и обработки данных с помощью ЭВМ. Химический
метод также может быть применен, но в этом случае необходимо вырезать из
вектора исследуемые фрагменты ДНК, и это усложняет всю процедуру.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
1. Жарких А.А. Методы филогенетического анализа генов и белков
//Молек.биология. (Итоги науки и техники. ВИНИТИ; М. 1985)
2. Компьютерный анализ генетических текстов / А.А.Александров,
Н.Н.Александров, М.Ю.Бородовский И ДР. М.: Наука.
3. Методы молекулярной генетики и генной инженерии. Отв. ред.
Р.И.Салганник.-Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1990.
4. Молекулярная клиническая диагностика.Методы: Пер. С англ. / Под ред.
С.Херрингтона, Дж.Макги. – М.: Мир, 1999.
5. Шабарова З.А., Богданов А.А. Химия нуклеиновых кислот и их компанентов.
– М.: Химия, 1978.
6. Шабарова З.А., Богданов А.А., Золотухин А.С. Химические основы генной
инженерии: Учебное пособие . – М.: Изд-во МГУ, 1994.
7. Экспериментальные методы исследования белков и нуклеиновых кислот /
Подред. М.А.Прокофьева. – М.: Изд-во МГУ, 1985.
| |  скачать работу |
Секвенирование |
