Генные болезни
ржит 1 700 п.о. и кодирует ранее неизвестный
белок из 294 аминокислотных остатков с молекулярным весом 32 КилоДальтона.
Ген дуплицирован. Его копия (возможно вариант псевдогена) располагается
несколько ближе к центромере и отличается от гена SMN наличием 5-и точечных
мутаций, позволяющих отличить оба гена путем амплификации экзонов 7 и 8 и
их исследованием методом SSCP анализа (см.Главу IV). Ген назван сBCD541, по
аналогии с первоначальным вариантом названия для теломерной копии, то есть
гена SMN, tBCD541. Ген cBCD541 экспрессируется, но в отличие от гена SMN
его сДНК подвергается альтернативному сплайсингу с утратой экзона 7.
Отсутствие гена SMN (tBCD541) у 93% больных (213 из 229), его разорванная
(interrupted) структура у 13 обследованных пациентов (5.6%) и наличие
серьезных мутаций у оставшихся 3-х больных дали основание именно данную
теломерную копию гена считать ответственной за заболевание. Существенно
отметить, что центромерная копия гена обнаружена у 95.5% больных, тогда как
отсутствует она только у 4,4% пациентов.
В непосредственной близости от теломерного конца гена SMN идентифицирован
еще один ген —ген белка-ингибитора запрогаммированной гибели нейронов
(neuronal apoptosis inhibitory protein -NAIP). При тяжелых клинических
формах СМА (Тип I), обусловленных делециями, по-видимому, нередко
происходит утрата гена NAIP.
Согласно гипотезе авторов СМА возникает при гомозиготном состоянии мутаций
(обычно-делеций) в гене SMN, при этом различия между формами СМА
определяются двумя основными факторами: 1. числом копий гена
cBCD541 (две —в случае Типа I и четыре (возникающих вследствие конверсии
между SMN и cBCD541) — в случае Типа III), 2. наличием или отсутствием гена
NAIP. Среди всех обследованных СМА-больных не обнаружены случаи
одновременной делеции обоих гомологичных генов - SMN (tBCD541) и
сBCD541,что указывает, по мнению авторов,на то, что такая аберрация должна
проявляться как доминантная леталь еще в эмбриогенезе.
Некоторые положения этой, безусловно, основополагающей работы французских
авторов, по-видимому, еще требуют уточнения, однако, уже сейчас она сделала
возможной прямую молекулярную диагностику СМА у 98,6% больных. С этой целью
проводится амплификация экона 7, который отсутствует у подавляющего
большинства больных. Нормальный экзон 7 (ген SMN) дифференцируют от
мутантного варианта (ген cBCD541) c помощью SSCP анализа. При необходимости
возможна косвенная диагностика —ПЦР анализ динуклеотидных (CA) повторов ДНК
локусов D5S125; D5S112; D5S127; ПДРФ-анализ с фланкирующими ДНК-зондами MU,
105—RA; 153— GT.
| |  скачать работу |
Генные болезни |
