Главная    Почта    Новости    Каталог    Одноклассники    Погода    Работа    Игры     Рефераты     Карты
  
по Казнету new!
по каталогу
в рефератах

Исследование клеточного цикла методом проточной цитометрии

енения в  ДНК-гистограмме  можно  рассматривать  как
проявление папилломо-вирусной инфекции в этиологии кондиломы  шейки
матки (K.C.Tsou, D.H.Hong, M.Varello et al, 1984).
  Кроветворная система
  При цитометрическом анализе клеточных элементов крови используют
критерии, которые включают довольно широкий спектр параметров.  Это
в  первую  очередь   цитометрические   маркеры   с   использованием
специфических красителей  на  РНК,  ДНК,  различных  ферментативных
систем  (эстеразу,   фосфатазу).   Используются   также   размерные
критерии, которые включают объем, площадь, периметр и диаметр  ядра
и цитоплазмы клеток, а также ядерно-цитоплазматическое отношение.
  При  исследовании  диагностического  материала  при   острых   и
хронических  формах   лейкозов   методами   цитометрии   обнаружены
некоторые различия для клеточных  элементов  той  или  иной  группы
гемобластозов. Используя морфометрические методы  оценки  размерных
признаков ядра и цитоплазмы  бластных  клеток,  обнаружена  строгая
корреляция величины  клеток  и  FAB  (франко-американо-британской)-
классификации лейкозов. При  сопоставлении  количественных  данных,
полученных  при  исследовании  клеточных   элементов   при   острых
лимфобластном  и  миелобластном   лейкозах,   классифицируемых   по
морфологическим признакам  на  подгруппы  М1  –  М6  согласно  FAB-
классификации, определены различия между двумя вариантами лейкозов,
кроме подгруппы М2.  Регистрируемые  различия  в  размере  бластных
клеток связаны с фазами клеточного цикла. Установлено,  что  клетки
при остром миелобластном лейкозе  в  S-фазе  цикла  характеризуются
большим размером ядра. Для этой же форме лейкоза, но  подгруппы  М1
характерна более  малая  доля  клеток  в  S-фазе  клеточного  цикла
(M.Efrench, P.A.Bryon, D.Fiere et al, 1981).
  Молочная железа
  С целью повышения диагностических  возможностей  цитологического
метода при  добро-  и  злокачественных  опухолях  молочной  железы,
определения    их     гистологических     вариантов,     разработки
прогностических критериев заболевания – также  используются  данные
морфометрии    и    цитоспектрофотометрии.    При    объективизации
цитологических  препаратов  исходя  из  информативности   следующих
признаков: диаметр, периметр и площадь ядра и  цитоплазмы,  ядерно-
цитоплазматическое отношение, текстура хроматина, содержание ДНК  и
РНК.  На   основании   цитометрических   исследований   установлены
некоторые  закономерности,  характерные  для  злокачественных  форм
опухолей    молочной    железы.    Это    вариабельность    ядерно-
цитоплазматического отношения, нарастание размера ядра и содержания
ДНК. Между двумя последними показателями обнаружена  корреляционная
зависимость, характеризующаяся следующими особенностями.  Показано,
что клетки с некоторой атипией,  которая  выражается  в  увеличении
площади ядра, распределяются различно по  фазам  клеточного  цикла.
Около 21% клеток, находящихся в области 4с  ДНК-гистограммы,  имеют
площадь ядер свыше 125 мкм2. При площади ядер от  50  до  100  мкм2
основная масса клеток находится в G1-фазе цикла и только  около  5%
клеток приходятся  на  гипердиплоидную  область  распределения  ДНК
(C.J.Cornelisse, A.J.Van Driel-Kulker, F.Meyer,  J.S.Ploem,  1985).
Показатель ДНК (количество ДНК в 1 клетке опухоли на количество ДНК
в нормальной клетке) в  различных  типах  злокачественных  опухолей
молочной железы  значительно  варьирует,  однако  чаще  наблюдается
тетраплоидия (60 – 80%), доброкачественные  опухоли,  как  правило,
диплоидные. Сравнительная оценка содержания ДНК в клетках  молочной
железы  при  доброкачественных   и   раковых   процессах   показала
определенную зависимость между соотношением клеток по фазам  цикла.
Установлено, что с прогрессированием процесса количество диплоидных
клеток в G1-фазе цикла убывает и  при  III  –  IV  стадии  ракового
процесса составляет 64%. Количество тетраплоидных клеток  нарастает
в 2 раза  и  составляет  около  17%  общего  количества  клеток  по
сравнению с  пролиферативной  формой  мастопатии  и  в  3  раза  по
отношению к непролиферативной форме мастопатии.



          ЗАКЛЮЧЕНИЕ

      Таким образом, как проточная, так и  статическая  цитометрия
позволяет исследовать многие  важные  параметры  клеточного  цикла.
Наиболее  распространенной  задачей,  решаемой  с  помощью  данного
класса  приборов,  является   идентификация   и   подсчет   клеток,
находящихся в различных  периодах  клеточного  цикла.  В  последнее
время  параллельно  с  этими  параметрами  с   помощью   цитометров
исследуют  также   динамику  экспрессии  многих  важных   клеточных
маркеров,  что  может  иметь  диагностическое   и   прогностическое
значение. Важно отметить, что принципиальных различий  между  двумя
типами цитометрии, по-видимому, не существует.  Поэтому  с  помощью
достаточно простых и недорогих приборов можно воспроизводить весьма
эффективные методики исследования клеточного  цикла,  первоначально
разработанные для дорогостоящих проточных цитометров. Такие системы
статической цитометрии включают в  себя  люминесцентный  микроскоп,
черно-белую    или    цветную    телевизионную    камеру    высокой
чувствительности, устройство для оцифровки телесигнала и компьютер.
В последнее время в подобных системах все более широко  применяются
цифровые  телекамеры,  которые  подключаются  к  компьютеру   через
высокопроизводительные  порты   нового   поколения   (универсальный
последовательный  порт).  Это  позволяет  создавать   недорогие   и
достаточно мощные системы для статической цитометрии, которые могут
успешно  конкурировать  как  с  проточными   цитометрами,   так   с
конфокальными  микроскопами.  В  целом  можно   сделать   вывод   о
перспективности   данного   направления   в   цитологии,    дающего
возможность широкого применения методов количественной  микроскопии
в научных исследованиях и клинической практике.



       ЛИТЕРАТУРА
  1. Брамберга Б.М., Зитаре И.Я.,  Плегере  Д.П.,  Смилтниекс  Э.Х.
     Терминологический словарь морфологических признаков клетки для
     автоматизации    цитологической    диагностики    и     оценки
     эффективности лечения. – Рига, 1970. – 160 с.
  2. Введение в количественную цитохимию. М., Мир, 1969, 439с.
  3. Исаев  В.Л.,  Пинчук  В.Г.,  Исаева  Л.М.  Современные  методы
     автоматизированных цитологических исследований. – Киев:  Наук.
     думка, 1988. – 218 с.
  4. Лимфоциты. Методы / под пед. Дж. Клауса-М., Мир, 393с.
  5.  Молекулярная  клиническая  диагностика.  Методы  /  под  ред.
     С.Херрингтона, Дж.Макги. – М.: Мир, 1999. – 558с.
  6. Полетаев А.И. Проточная цитометрия и сортировка  в  цитологии,
     молекулярной биологии, биотехнологии и медицине.  М.,  ВИНИТИ,
     1989, 87с.
1234
скачать работу

Исследование клеточного цикла методом проточной цитометрии

 

Отправка СМС бесплатно

На правах рекламы


ZERO.kz
 
Модератор сайта RESURS.KZ