Методы разделения иммуноглобулинов
дчеркнуть, что указанные авторы разработали способ выделения
чистого IgG из нормальной сыворотки крови человека, испольэуя ДЭАЭ
-сефадекс А-50 типа грубый и 0,01 М калий- фосфатный буфер рН, 6,5 . Однако
З.С. Сеитов и Ж.Ж.Жумашев (1966) этим методом не смогли выделить
иммунохимически чистый иммуноглобулин G2 из сыворотки крови лошадей. Им
удалось выделить смесь белков состоящую из IgG2 и IgМ и IgА. Аналогичные
результаты получены при выделении IgG2 из из нормальной сыворотки овец
(Ж.Ж.Жумашев, З.С.Сеитов, 1968 а, б).
Результаты, отличные от результатов Baumstark et al (1964), по-видимому
, обусловлены особенностями белкового состава сыворотки крови этих видов
животных. Таким образом, указанный метод - также способ предварительного
выделения IgG2 из нормальной сыворотки крови.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В заключение необходимо отметить, что американскому биохимику G.Edelman
(1972) и английскому биохимику К.РогIgг (1972), работающим в области
изучения человеческих иммуноглобулинов была присуждена Нобелевская премия
1972 года. Присуждение Нобелевской премии указывает на большое внимание
мировой научной общественности к иммуноглобулинам и на достижение
определенных успехов з изучении иммуноглобулинов человека.
Что касается иммуноглобулинов сельскохозяйственных животных, то, к
сожалению, многие вопросы выделения, идентификации и количественного
определения этих защитных белков остаются еще слабо разработанными.
Главный защитный белок сельскохозяйственных животных IgG. Причем он
существует в виде двух подклассов: G1 и G2, которые различаются
аминокислотным составом, электрофоретической подвижностью, антигенным и
биологическим свойствам. Однако выделение из сыворотки крови чистых
препаратов IgG1 - очень сложная, и следовательно, не до конца решенная
проблема.
Поэтому большинство литературных данных по этому вопросу касается IgG и
лишь немногие IgG1 и IgG2.
IgM один из высокомолекулярных и сложноорганизованных белков сыворотки
крови, состоящий из 5 субъединиц, соединенных лабильными дисульфиными
связями. Этим и объясняется трудность его выделения и изучения. Хотя
существуют несколько современных методических приемов, помогающих его
выделению, ни один из них в отдельности не обеспечивает получения чистого
IgМ. Поэтому необходимо использовать комбинированные методы, основанные на
особенностях его физико-химических свойств.
Так, до сих пор остается сложной задачей приготовление высокоочищенного
IgМ, пригодного для изучения его структурных особенностей и аминокислотного
состава, антигенных свойств, а также получение к нему моноспецифических
иммунных сывороток. По-видимому, этим и объясняется отсутствие работ по
изучению пептидной структуры и аминокислотного состава IgМ у различных
видов животных. Относительно мало работ, выполненных с помощью
моноспецифических иммунных сывороток к IgM у животных, особенно у лошадей и
овец.
Однако особый интерес, особую сложность для выделения представляет IgА,
в частности у жвачных - крупного рогатого скота и овец. Это прежде всего
связано с его небольшим содержанием в нормальной сыворотке крови. IgА
относительно хорошо изучен только у человека благодаря появлению гибридом
и моноклональных антител.
Изучение IgА у сельскохозяйственных животных начато недавно. Так, не
изучены его структурные особенности и аминокислотный состав, слабо -
электрофоретические, хроматографические и гель-фильтрационные свойства и
молекулярные размеры.
Изучение иммунологического статуса животных методом радиальной
иммунодиффуэии с использованием моноспецифических иммунных сывороток имеет
практическое значение. Однако в настоящее время почти отсутствуют
исследования по установлению уровня иммуноглобулинов у отечественных пород
крупного рогатого скота, овец, лошадей и других сельскохозяйственных
животных. Неизвестно также, как изменяется количественное соотношение
иммуноглобулинов в зависимости от породы, пола, возраста, сезонов года и
продуктивности животного. Пока мало исследованы иммуноглобулиновый спектр
новорожденных и динамика содержания иммуноглобулинов в возрастном аспекте,
особенно у лошадей и овец.
Изучение иммуноглобулинов человека показало, что во многих случаях
нарушается биосинтез иммуноглобулинов, обусловливающий изменения
нормального соотношения их в сыворотке. Такие исследования проведены
только у человека и отсутствую у сельскохозяйственных животных. Пока не
изучены и качественные и количественные изменения состава иммуноглобулинов
при различных заболеваниях инфекционного и инвазионного характера.
Слабо изучена природа иммунного ответа у вакцинированных животных,
особенно крупного рогатого скота и овец. Многочисленные исследования общего
белка и его фракций у различных животных проведены главным образом методом
электрофореза на бумаге, который имеет ограниченную аналитическую
возможность. Это справедливо в отношении динамики белковых фракций
сыворотки крови у молодняка сельскохозяйственных животных в возрастном
аспекте, а также иммуноглобулинового, белкового и казеинового состава
молозива и молока овец и лошадей.
Таким образом, исследование иммунохимических особенностей и
количественного содержания иммуноглобулинов сельскохозяйственных
животных имеет как теоретическое, так и практическое значение.
ЛИТЕРАТУРА
1. Басова Е.Н., Стефани Д.В. Некоторые особенности выделения миеломных
IgG человека различных субклассов и их распределение по аллотипам,
субклассам и типам легких цепей// Журн. микробиолог. - 1977. - №5. - С. 77-
81.
2. Басова Е.Н., Стефани Д.В., Казанцева Л.З. Иссчледования субклассов
IgG человека. Сооб.II. Уровни отдельных субклассов IgG в парных сыворотках
крови жителей северного села - изолята// Журн. микробиолог. - 1979. - №7. -
С. 35-39.
3. Бернет Ф. Клеточная Иммунология. - М.: Мир, 1971. - 549 с.
4. Edelman J.M. Antibody structure and molecular immunology//Nobel
lecture. Dec. 12 1972; Stocholm, 1973. - p. 147-170
5. Heimer R., Clark L.C., Mourer P.H. Immunoglobulins of sheep//Arch.
Biochem. Biophys. - 1969 - v.131. - p. 9-17.
6. Kehoe J.M., Tomosi T.B., Ellous F., Capra J. Identification of J-
chain in a homogeneous canine IgA immunoglobulin//J. Immunol - 1972 - v.109
- p.59-64.
7. Menta P.D., Reichin M. Comparative studies of vertebrate
immunoglobulins//J. Immunol - 1972 - v.109 - p.1272-1277.
8. Ж.Ж.Жумашев, М.Б.Бабаев, Ш.С.Алимжанова, М.А.Туганбекова.
Иммуноглобулины животных. Алматы. 1994.
| |  скачать работу |
Методы разделения иммуноглобулинов |
