Главная    Почта    Новости    Каталог    Одноклассники    Погода    Работа    Игры     Рефераты     Карты
  
по Казнету new!
по каталогу
в рефератах

Методы разделения иммуноглобулинов



 Другие рефераты
Методы количественного обнаружения в образцах экологически опасных радионуклидов Методы обессоливания нефти и нефтяного Методы умягчения воды Методы аналитической химии

КАЗАХСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
                              Кафедра биохимии



                                   РЕФЕРАТ


                     «Методы выделения иммуноглобулинов»


                                                    Выполнила Сулемейнова Г.


                                    Руководитель: доктор биологических наук,
                                                      профессор Жумашев Ж.Ж.



                              Алматы, 1999 год
                                  ВВЕДЕНИЕ
    Иммуноглобулины - основные  защитные  белки   организма,   так  как  они
обладают свойствами различных антител.  Они содержатся в крови,  молозиве  и
молоке, слюне и других жидкостях. С их  количеством  и  активностью  связаны
жизнестойкость,  физиологическое состояние и продуктивность животных.
    В работе описаны свойства иммуноглобулинов, как белков, а также  способы
разделения иммуноглобулинов сельскохозяйственных животных.
    Представленные данные  по  характеристике,  выделению  иммуноглобулинов,
могут дать современные представления о защитных белках животных.
      ИММУНОГЛОБУЛИНЫ -  СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА
    Важнейшие  факторы    специфического   иммунитета   -   иммуноглобулины,
осуществляют гуморальную защиту организма.
    Дж.Хереманс (1959),   изучая  активность  иммунной  сыворотки  человека,
обнаружил, что  антитела  содержатся,  по  меньшей  мере,  в  трех  фракциях
сыворотки: в (- и в двух фракциях (- глобулинов,  называемых  (2А  и  (2М  -
глобулинами. Эти фракции, активные  в иммунологическом отношении,   Хереманс
предложил назвать иммуноглобулинами (Ig).  Предложение Дж.Хереманса легло  в
  основу  международной  номенклатуры,  принятой  в  1664   г.   специальной
комиссией ВОЗ.  По  этой  номенклатуре   (-глобулин   называется  IgG,  B2A-
глобулин - IgA и В2М - IgM. Иммуноглобулин состоит  из  двух  легких  (L)  и
двух   тяжелых    (Н)    полипептидных    целей.   Причем    каждый    класс
иммуноглобулинов характеризуется особым типом тяжелых цепей (, (, (, d, (.
    Легкие цепи бывают двух типов - ( или (,  каждвй из которых отличается С-
  концевой  последовательностью  аминокислот. Как  тяжелые,  так  и   легкие
 цепи  состоят ив двух различных участков (областей) -  вариабельной  (V)  и
постоянной  (С).  С-концевая  половина полипептидной цепи  имеет  постоянную
аминокислотную последовательность, а ее N - концевая часть  -  вариабельную.
Каждый  постоянный  (Сl) и вариабельный (Vl) участок  легкой  цепи  включает
107-110 аминокислотных остатков.
    Тяжелые цепи  построены  их  четырех  участков  -  VH,  C1H,  C2H,  C3H.
Вариабельные участки их состоят  приблизительно  из  110-114  аминокислотных
остатков, постоянные - 330.
    В вариабельной части полипептидных цепей  находятся   определенные,  так
называемые "гипервариабельные участки", с наибольшим  числом  аминокислотных
замен.  В  легких  цепях  они  расположены  между   24-34;   52-55;    89-97
аминокислотными   остатками.   Гипервариабельные   участки   тяжелых   цепей
занимают   аналогичные  положения,  но  точная  локализация   их   пока   не
установлена (Кульберг, 1975; Поляк 1981).
    Наличие  вариабельных  участков  дает  молекулам   антител   возможность
приспосабливаться  к  разнообразным   антигенным   детерминантам.   Строение
постоянных областей тяжелых цепей определяет эффекторные функции  молекул  к
поверхностям макрофагов. В-лимфоцитов, тучных клеток, а также  проникновение
через плацентарную мембрану (Егоров , 1972; Leslie, Cohen, 1973).
    Гибкость молекул иммуноглобулинов,  обеспечивающая  приспособляемость  к
различным конфигурациям молекул антигена,  обусловливается  также   наличием
особого "шарнирного участка" в середине тяжелых  цепей,   содержащего  много
остатков  аминокислоты  пролина  и  препятствующего  образованию   вторичной
структуры.
    В  настоящее  время   на   основании   изучения   первичной    структуры
полипептидных  цепей  выдвинута так называемая "доменная" гипотеза  строения
иммуноглобулинов, согласно которой молекулу иммуноглобулинов  можно  разбить
на  участки  с  относительно  независимыми  конфигурациями  в  виде  глобул.
Каждый  домен  состоит приблизительно из 100-110 аминокислотных  остатков  и
имеет одну дксудьфидную связь,  которая связывает  участки  цепей,   образуя
петлю из  60  аминокислотных  остатков  (Еdelman,   1970;   Незлин,  Рохлин,
1970; Роljak, 1972).
    Молекула иммуноглобулина G состоит из 12 доменов:  по 4 в  тяжелых и  по
2 в легких полипептидных цепях (рис.1).  Используя   молекулярные  модели  и
ряд общих термодинамических принципов укладки  третичной  структуры  белков,
установлено,   что   конформации   всех   12   доменов   иммуноглобулина   G
характеризуются большим количеством (- складок и наличием  одно-двух  витков
(- спиральной структуры (Завьялов, Троицкий, 1973).
    На основании  изучения  воздействия  протеолитических  ферментов  сделан
вывод, что молекулы иммуноглобулинов состоят  из  в   трех  фрагментов  двух
типов, связанных гибкими участками полипептидных цепей: два из  них  названы
Fab- и один Fc- фрагментами   (Рогtег,  1959,  1960;  Utsumi  Karush,  1955,
1967).
    В состав FAB- фрагментов  входят  целая  легкая  цепь  и  N  -  концевая
половина тяжелой цепи. Структурная особенность FAB- фрагмента  наличие  двух
глобулярных субъединиц - V и С. V построена из двух доменов VH и V1L,  а  С-
из CL и C1H. Fc-фрагмент содержит по два домена - C2H и Сн3 (Роljak, 1972).

           Рис. 1. Схема строения молекулы IgG1 человека (из книги
                     Иммуноглобулины".- М.: Мир., 1981).
    L- цепи разделены на две гомологичные области VI.  (вариабельная)  и  СL
(константная). Утолщенные линии Н-цепей  соответствуют  шарнирному  участку.
Показаны 4 гомологичные области Н-цепей (VF, С1Н,  С2Н,  С3Н),  внутри  -  и
межцепочные дисульфидные  связи,   N-  концевые  участки   обоих   цепей   и
основные  фрагменты (FAB, FAB' и Fc).

    В состав молекул некоторых классов иммуноглобулинов входят дополнительно
полипептидные цепи. В молекуле сывороточного и секреторного  иммуноглобулина
А  она  названа  J-  цепочкой.  (НАLPERN,  KOSHLAND,  1970).  Выяснено,  что
аналогичные полипептиды содержатся также и в молекулах   иммуноглобулина   М
(Меstresky et al., 1971). J-цепочки иммуноглобулинов М и А имеют  одинаковые
молекулярную    массу,    электрофоретическую    подвижность,     антигенную
специфичность и аминокислотный  состав  (Меtresky  et  al,  1971;  Моrrison,
Коshland, 1972). В полимерных  молекулах  иммуноглобулинов  различных  видов
животных также содержится полипептид,  аналогичный  полипептиду  J-  цепочки
иммуноглобулинов человека (Kobajashi et al, 1973).
    Молекулярная  масса  J-  цепи  колеблется  от  14  000-   27000.   Такое
расхождение объясняется, по-видимому, склонностью J цепей образовать  димеры
(Коshland, 1975). Содержание углеводов в них около  7,5  моль  %.  Определен
аминокислотный состав J- цепей выделенных из IgA и  IgМ  человека,  а  также
животных. Изолированные цепи отличаются высоким  содержанием  аспарагиновой,
глутаминовой кислот  и  цистеина  и  почти  полным  отсутствием  трипто-фана
(Morrison, Коshland, 1972; Zikand 1972; Kehoe et al, 1972;  Mestesky  et  al
1975).
    Предполагается, что J цепи  необходимы  для  присоединения  секреторного
компонента к IgA и облегчают димеризацию  IgA  b  и  полимеризацию  IgМ.  По
мнению Л.В.Часовниковой и др. (1983),  большая  информационная  стабильность
молекул IgA, по сравнению с IgM обусловлена наличием J-  цепи,  объединяющей
молекулу IgA в димерную форму.
    В  состав  секреторного  IgА  входит  еще  один  полипептид,   названный
секреторным компонентом  (Brandtzaeg,  1968,  1974;  Fomasi  et  al,  1968).
Секреторный  компонент   обнаружен   у   всех   видов   сельскохозяйственных
животных,   коров   (Mashetal, 19б9; Butler et al,  1972);  свиней  (Bourle,
1969); кроликов (Halperl, Koshland, 1970); овец и коз  (Pahud  Mach,  1970);
лошадей (Pahud Mach, 1972). Он существует как в связанном с секреторным  IgA
- (сСК), так и в свободном виде - (нСК).  Молекулярная  масса  связанного  и
свободного секторного компонентов у человека колеблется  от  50  000  до  90
000, у овец, коз и лошадей молекулярная масса нСК  80  000-  85  000  (Pahud
Mach, 1970, 1972). Содержание углеводов -  15,9  -  22,8%.  Определен  также
аминокислотный  состав  свободного  секреторного  компонента   у   человека,
крупного рогатого скота и собаки (O’Daily, Cerba, 1971; Fomasi, Jrey,  1972;
Mestesky, 1972; Fhopson et al, 1975).
    Секреторный компонент связан о шарнирной областью молекулы  IgА  в  зоне
расположения  углеводов  (Winkelhanke,  1979).  Полагают,  что  его  функция
заключается  в  защите  секреторного  IgА  от  воздействия  протеолитических
ферментов, что очень важно (Стефани, 1973; Чернохвостова, 1974).
    Активные центры  -  участки  молекул,  от  которых  зависит  способность
антител    специфически  связываться  с  антигеном.  Обычно   они   занимают
небольшой участок (приблизительно 2%  от  всей  поверхности  целой  молекулы
антитела),  который  ,  находясь  в  Fab-   фрагментах,   придает   молекуле
иммуноглобулина уникальные изменчивость и специфичность (Носсел, 1973).
    Известно,  что  в   построении   активного   центра   участвуют   только
гипервариабельные участки как тяжелых,  так  и  легких  цепей  Fab-фрагмента
(Poljak et al, 1973, Padlan et al, 1973;  Leslie  et  al,  1973).  При  этом
основная  роль   принадлежит   тяжелым   цепям,   а   легкие   участвуют   в
пространственной организаций тяжелых, препятствуя их агрегации.
    Углеводные компоненты.  Все классы иммуноглобулинов отличаются друг   от
друга количественным содержанием  углеводного  компонента.  Наиболее  богаты
углеводами иммуноглобулины М, А,  Е и
1234
скачать работу


 Другие рефераты
История Коми
Аскания-Нова
Сегментация рынка
Родина и народ в творчестве Н.А. Некрасова


 

Отправка СМС бесплатно

На правах рекламы


ZERO.kz
 
Модератор сайта RESURS.KZ